用交聯(lián)劑如多聚甲醛固定蛋白質比用有機溶劑能更好地保持細胞結構,但可能降低某些細胞組分的抗原性。經(jīng)多聚甲醛固定后,與胞內自由氨基結合的抗體也許不再識別這些抗原。如果抗體在其他實驗中效果良好,但在經(jīng)多聚甲醛固定的標本中不能有效地作用,可以嘗試逐步降低多聚甲醛的濃度。這樣雖然使細胞內各成分的交聯(lián)程度降低,但有利于細胞結構的保持,可以使抗體更好地與抗原中的某些結合部位接觸。
大多數(shù)化學品的穩(wěn)定性還是比較好的,具體情況要由實際使用要求來判定。如果分析數(shù)據(jù)作為一般了解,或者分析結果沒有特定的準確要求,如一般教學實驗,對化學試劑的質量級別就可以做一般要求。但工廠化驗數(shù)據(jù)為指導生產而用,化學試劑的質量指標絕對不能含糊。
色譜純是指進行色譜分析時使用的標準試劑,在色譜條件下只出現(xiàn)指定化合物的峰,不出現(xiàn)雜質峰。純度上,色譜純>優(yōu)級純>分析純>化學純。色譜純的試劑雜質比分析純的更少,價格相對高很多的。所以,從經(jīng)濟方面講,一般化驗分析用分析純即可,色譜分析時選用色譜純試劑。
酸性染料比色法主要用于測定溶液中某些成分的含量。例如,利用酸性染料與特定離子形成的離子對顏色變化,可以定量分析溶液中的離子濃度。這種方法在化學、生物化學和醫(yī)學等領域有廣泛應用。
凝膠過濾層析原理:當不同分子大小的蛋白質混合物流進凝膠層析柱時,比凝膠網(wǎng)孔大的分子不能進入珠內網(wǎng)狀結構,排阻在凝膠珠以外,在凝膠珠縫隙間隙中向下移動。而比孔小的分子不同程度地進入凝膠珠內,這樣由于不同大小分子所經(jīng)歷的路徑不同而到分離。
在TRIzol中,RNA是隔離在RNA酶污染之外的。而對樣品的后續(xù)操作會要求用無RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在150°C 的烘箱中烘烤4小時。塑料器皿可以在0.5 M NaOH 中浸泡10 分鐘,用水徹底漂洗干凈后高壓滅菌備用。